Puzzle Neuronas 4 de Hippocampal

La distribución de las neuronas hippocampal que expresaban EGFP del promotor Nr4a1/Nur77 (Tg (Nr4a1-EGFP) GY139Gsat, www.gensat.org) en CA1 hippocampal colabelled para el transportador vesicular del glutamato (VGluT1, rojo, Invitrogen policlonal, 1:1000) y manchó con DAPI (azul) para mostrar capas de la célula. La expresión de EGFP fue amplificada con el pollo anti-GFP (Abcam, 1:2000). Los terminales excitadores de las etiquetas VGluT1 en los campos dendríticos de las células piramidales en estrato orien y radiatum del estrato. Nr4a1-EGFP es expresado pesadamente por las células piramidales CA1 y en un grado inferior en las células piramidales CA3 con las células escasas en la convolución del cerebro dentada (véase las imágenes asociadas). La sección (40 um, sagital) fue montada con Fluoromount G y reflejado con un 32X, 0,4 objetivos del NA LD Achroplan en un microscopio de Zeiss Axiovert. AF568 era emocionado en 562/40 nanómetro y emisión recogidos en 624/40 nanómetro con los filtros de Semrock y una sola banda dicroica (530-585 nanómetro reflejado, 601-800 nanómetro transmitido). AF488 era emocionado en 482/35 nanómetro y emisión recogidos en 536/40 nanómetro con los filtros de Semrock y una sola banda dicroica (446-499 nanómetro reflejado, 513-735 nanómetro transmitido). DAPI era emocionado en 350/50 nanómetro y emisión recogidos en 460/50 nanómetro con un CLP400 dicroico (croma). Las solas imágenes fueron capturadas para cada canal usando SR. CCD de Zeiss Axiocam y pseudo-coloreadas usando Axiovision. La substracción linear del fondo fue utilizada en la actual imagen. Vea la identificación 21305052 de Davis y de Puhl (2011), de Pubmed, para un protocolo de coloración detallado y las imágenes de la expresión de EGFP en el striatum y el amygdala en esta tensión. Esta imagen es parte de una serie que caracteriza la expresión de EGFP del promotor Nr4a1 en el cerebro.